<center id="49wez"><em id="49wez"></em></center>
      <code id="49wez"><small id="49wez"><optgroup id="49wez"></optgroup></small></code>
      <code id="49wez"><small id="49wez"><track id="49wez"></track></small></code>
      <th id="49wez"><option id="49wez"><acronym id="49wez"></acronym></option></th>

    1. <object id="49wez"></object>
      English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
      當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 鈣黃綠素的用途及使用過程中的注意事項

      鈣黃綠素的用途及使用過程中的注意事項

      瀏覽次數:608 發布日期:2024-4-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
      百螢生物為您總結的關于鈣黃綠素實驗中可能會遇到的相關問題
      1.鈣黃綠素產品的用途是什么?
      答:鈣黃綠素是用來標記和監測活細胞的細胞功能的一類熒光探針/試劑盒。它只針對活細胞進行染色,不能染已固定的細胞。
      注:染色時間不可太久,保持在內,后,熒光會變得不明顯。
       
      2.鈣黃綠素中帶AM與不帶AM的探針有什么區別?它們的優點是什么?
      答:不帶AM的探針可以直接注射進入細胞,而帶AM的探針,因為AM 具有細胞膜滲透性,一旦進入細胞,被細胞內酯酶水解為鈣黃綠素(Calcein),產生強烈的綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。因不具細胞膜滲透性,從而能被保留在細胞內。Calcein Red和Calcein Deep Red兩種類似物,使其能夠替代Calcein AM用在活細胞的標記和功能分析的多重標記研究。AM酯是非極性酯,其易于穿過活細胞膜,并且通過活細胞內的細胞酯酶快速水解。AM酯廣泛用于非侵入性地將各種極性熒光探針加載到活細胞中。但是,使用AM酯時必須小心,因為它們易于水解,特別是在溶液中。它們應在使用前重新配制成高質量的無水二甲基亞砜(DMSO)。DMSO儲備溶液可以在-20℃下干燥儲存并避光。在這些條件下,AM酯可以穩定數個月。
       
      3.鈣黃綠素的染色過程需要注意哪些問題?
      答:細胞離心,去培養基,清洗細胞1~2次,以充分去除殘留的培養基,稀釋成工作濃度為2-5μM (PBS 或 HBSS-HEPES) 有時可添加一定量的非離子表面活性劑如Pluronic F127到Calcein Red ™儲存液內來增強其水溶性37℃ 孵育20min~1h用PBS(或者其他緩沖液)洗滌細胞兩次去除多余染料。

      注:
      1.細胞活力理想的濃度范圍應在4-5μM
      2.如果細胞中含有有機陰離子轉運蛋白,可以在細胞培養基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以減少脫酯化。
      3.因為背景高的原因,需要多清洗細胞幾次去除多余染料。
       
      4.鈣黃綠素適用于哪些儀器?
      答:熒光顯微鏡、流式細胞儀
      注:使用流式細胞儀時需要立即分析細胞樣品,以確定在零時間沒有洗滌的每個細胞的平均熒光。
       
      5.鈣黃綠素與其他活細胞染料相比有何優勢?
      答:鈣黃綠素與其他同類產品(如CFDA、CFSE等)相比是特別適合染活細胞的熒光探針,因為它的毒性特別低。并且它不會抑制細胞的各種功能,如增殖、趨化性等。
      注:鈣黃綠素和碘化丙啶(PI)常用于鑒別死活細胞。鈣黃綠素的親脂性很高,可以通過細胞膜,脫去AM后發生強烈綠色熒光;而碘化丙啶(PI)不能通過活細胞的細胞膜,它僅可以穿過死細胞膜,嵌入其DNA螺旋產生紅色熒光。由于鈣黃綠素與碘化丙啶在490nm處均可被激發,545nm激發僅可觀察死細胞。因此,他們被用于活細胞和死細胞雙重染色。
       
      6.鈣黃綠素在作為顯色劑時如何很好的溶解?
      答:鈣黃綠素在在1mol/L的氫氧化鈉溶液中,溶解度能達到50mg,并且超聲助溶不會破壞其結構。
      來源:西安百螢生物科技有限公司
      聯系電話:029-68064558
      E-mail:zx@tjbiolite.com

      用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
      評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
      Copyright(C) 1998-2024 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
      精品久久8x国产免费观看